王静-红细胞表面抗原弱表达检测.pdf

1、国家儿童医学中心上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心 王静1上海儿童医学中心01血型鉴定技术02血型基因鉴定的临床应用03ABO基因的特点04案例分享2上海儿童医学中心血型鉴定技术013上海儿童医学中心血型的发现血型的发现目前共发现47个红细胞血型系统，2556个等位基因。除此，白细胞、血小板、血浆等也有各自血型。4上海儿童医学中心ISBT numberBlood Group SystemISBT numberBlood Group SystemISBT numberBlood Group System1ABO16LW32JR2MNS 17CH/RG33LAN3P1PK18H34VEL4RH

2、D19XK35CD594RHCE20GE36AUG5LU 21CROM37KANNO6KEL 22KN38SID7LE23IN39CTL28FY24OK40PEL9JK 25RAPH41MAM10DI26JMH42EMM11YT27I43ABCC112XG28GLOB44Er13SC29GIL45CD3614DO 30RHAGTranscription FactorGATA115CO31FORSTranscription FactorKLF15上海儿童医学中心传统血清学鉴定方法传统血清学鉴定方法试管法（标准血清学检测）试管法（标准血清学检测）通过抗原-抗体反应原理，使用已知抗血清检测红细胞表面

3、抗原（正定型）或已知标准红细胞检测血清中抗体（反定型）。该方法需离心观察凝集现象，结果稳定但耗时长（约30分钟/样本），适用于常规输血前检测。玻片法（快速筛查玻片法（快速筛查，不能用于发放血型报告，不能用于发放血型报告）微柱凝胶法（自动化检测）微柱凝胶法（自动化检测）将抗血清与待检红细胞在载玻片上混合，通过肉眼观察凝集反应。操作简便（5-10分钟出结果），适合大规模筛查，但易受环境温度、操作手法影响准确性，需配合试管法验证。利用凝胶分子筛分离凝集与非凝集红细胞，阳性（+）时红细胞位于凝胶上层，阴性（-）时位于凝集底部。可实现高通量检测（每小时处理200+样本），结果判读客观，需要全自动或半自动

4、化血型分析仪。1236上海儿童医学中心血清学技术无法检测弱抗原（如ABO亚型），并且易受输血后嵌合状态干扰，且Rh系统部分抗原（如RhD变异型）存在血清学漏检风险，近年发现临床上约0.1%的输血反应由血清学漏检导致。分子生物学技术的引入分子生物学技术的引入血清学技术局限性血清学技术局限性1990年代人类基因组计划揭示ABO血型基因位于9q34.1-9q34.2，包含7个外显子；Rh血型系统涉及RHD和RHCE两个紧密连锁基因。2010年国际输血协会（ISBT）建立血型等位基因数据库，收录超300种血型相关基因变异。基因多态性研究突破基因多态性研究突破随着造血干细胞移植、稀有血型库建设等发展，要

5、求血型鉴定分辨率达等位基因水平。分子技术可识别血清学无法区分的CisAB型、B(A)型等罕见血型，误差率低于0.01%。精准医疗需求推动精准医疗需求推动7上海儿童医学中心血型基因鉴定的临床应用028上海儿童医学中心疑难血型鉴定疑难血型鉴定的临床意义的临床意义血清学干扰的血清学干扰的排除排除当患者存在自身抗体、近期输血或血液病导致抗原减弱时，传统血清学方法可能无法准确鉴定血型。分子诊断技术通过直接检测基因序列，可排除抗体干扰，例如成功鉴定ABO亚型（如A3、B3）和弱D变异型（如DEL型）。复杂遗传背景分析复杂遗传背景分析新生儿溶血病预测新生儿溶血病预测对于类孟买型或Rh缺失型等罕见血型，需结合

6、PCR-SSP、Sanger测序或高通量测序技术，分析FUT1、RHD基因的插入/缺失突变，明确等位基因组合模式。通过检测孕妇和胎儿RHD基因外显子多态性，可预测RhD阴性孕妇胎儿溶血风险，指导产前干预。1239上海儿童医学中心输血安全性的提升输血安全性的提升弱表达型精准管理弱表达型精准管理自动化分子诊断系统自动化分子诊断系统高频抗原兼容性检测高频抗原兼容性检测采用荧光定量PCR区分弱D型与部分D型，前者可接受RhD阳性血，后者则需按阴性处理，避免抗D抗体产生。对Kidd、Duffy系统进行基因分型（如FY02N.01），预防抗-Jkb、抗-Fyb抗体引