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1、544AFlow Cytometry Reagents流式在细胞治疗上的应用细胞治疗概述1第一章 流式细胞仪在干细胞治疗的应用1第一节 造血干细胞表型鉴定中的应用1第二节 外周血干细胞移植中的应用2第三节 造血干细胞保存中的应用2第四节 间充质干细胞表型鉴定中的应用3第二章 流式细胞仪在肿瘤免疫细胞治疗的应用7第一节 细胞因子介导的杀伤细胞（cytokine induced killer，CIK）疗法8第二节 树突状细胞（DC）免疫治疗9第三节 树突状细胞联合细胞因子诱导的杀伤细胞免疫治疗 (DC- CIK)10第 四 节 T 细 胞 疗 法 10第五节 T 细胞受体疗法（TCR）12第六节

2、CAR-T 治疗13第三章 流式细胞仪对细胞治疗的疗效评价的应用17第四章 流式细胞仪分选在细胞治疗的应用18目录1流式在细胞治疗上的应用细胞治疗概述细胞治疗是近几年兴起的疾病治疗新技术，是指利用某些具有特定功能的细胞的特性，采用生物工程方法获取和 / 或通过体外扩增、特殊培养等处理后，使这些细胞具有增强免疫、杀死病原体和肿瘤细胞、促进组织器官再生和机体康复等治疗功效，从而达到治疗疾病的目的。细胞治疗以其良好的疗效，副作用小，更个体化、个性化等独特的优势，为一些难治性疾病的治疗，提供了一种选择，有时甚至是最后的选择。在当前和今后很长的历史阶段，细胞治疗都将在临床治疗中担当重要的角色，二十一世纪

3、将是细胞治疗发挥重要作用的时代。细胞治疗分为两大类：干细胞治疗；免疫细胞治疗。第一章 流式细胞仪在干细胞治疗的应用干细胞技术，又称为再生医疗技术，是指通过对于干细胞进行分离、体外培养、定向诱导、甚至基因修饰等过程，在体外繁育出全新的、正常的甚至更年轻的细胞、组织或器官，并最终通过细胞组织或器官的移植实现对临床疾病的治疗。目前临床应用的主要是成体干细胞，这类细胞包括造血干细胞、间充质干细胞、神经干细胞。第一节 造血干细胞表型鉴定中的应用随着近年来造血干细胞移植病例的日益增多，造血干细胞的流式定量越来越成为一个突出的话题。如何准确地定量干细胞数量，什么是有效的质量控制成了各大实验室的话题。1995

4、 年， 血 液 病 治 疗 及 移 植 国 际 联 合 会 (the International Society of Hematotherapy and Graft Engineering，ISHAGE) 成立了干细胞绝对计数 (Enumeration) 小组，致力于寻求一种简单、快速、灵敏的流式细胞仪检测方法去定量外周血中的造血干细胞数量。这一方法对于临床实验室中不同的流式细胞仪都有效，而且在不同的移植中心具有可比性。这一方案即在 96 年问世的 ISHAGE 方案，至今为止，其他各种方案改进均以此方案为基础。干细胞移植对于白血病等多种疾病的治疗具有重要意义，而准确的干细胞绝对计数对于干细

5、胞移植的成败又十分重要。流式细胞仪结合荧光单抗计数为干细胞绝对计数提供了一种快速、定量、重复性好的方法。文章：1. Single Platform Flow Cytometric Absolute CD341 Cell Counts Based on the ISHAGE GuidelinesMichael Keeney,el Cytometry (Communications in Clinical Cytometry) 34:6170 (1998)在 EPICS XL 上使用使用 Stem-Kit 试剂盒运用 ISHAGE 法定量检测造血干细胞2第二节 外周血干细胞移植中的应用正常情况下外

6、周血干细胞含量很少，需要进行动员处理方可有效增加外周血干细胞含量，以供移植时采集。准确计数 CD34+ 细胞的数量，可判定骨髓动员方案是否成功，何时开始采集及何时终止采集 PBSC。第三节 造血干细胞保存中的应用造血干细胞保存是造血干细胞治疗技术的重要组成部分，现已广泛用于临床。脐血干细胞来源广泛，采集方便，作为造血干细胞容易获得，但需冻存保存，保存条件要求高，规模要求大，需相当投资规模的脐血库来进行保存。文章：脐血造血干细胞不同温度长期冻存效果的实验研究（许利民，王劲等 . 中国现代医学杂志2007 年 第 24 期）3第四节 间充质干细胞表型鉴定中的应用间充质干细胞是一种来源于中胚层具有自